AAV包装上清是需要收集的
病毒颗粒存在
AAV病毒颗粒不仅存在于细胞内,还有一部分会分泌到培养基的上清中。如果只收集细胞而忽略上清,会损失一部分病毒颗粒,从而降低病毒的回收效率和产量。
提高回收效率
同时收集细胞和培养上清液,可以更全面地获取病毒颗粒,提高病毒的回收率,这对于后续的实验或应用来说是非常重要的,能够确保获得足够数量的病毒用于研究或治疗等目的。
具体收集方法
离心收集:在AAV包装和扩增一定时间后,如转染后48-72小时,进行8000rpm离心10分钟,收集含有AAV的上清。
混合收集:将收集到的病毒上清与经过处理的包装细胞沉淀的上清混合,再进行后续的纯化操作,如滤膜过滤等,提高病毒回收效率。