包装好的AAV(腺相关病毒)的储存时间主要取决于保存条件。以下是不同储存方式下的保存期限及注意事项:
1. 短期保存(4℃)
保存期限:AAV病毒在4℃下可以短暂存放 1-3天,建议尽快使用以确保病毒活性。
适用场景:适用于实验操作中的短期存放(如运输或待用),但不适合长期保存。
2. 长期保存(-80℃)
保存期限:分装后于-80℃冷冻可保存 6个月至1年。如果储存时间超过6个月,建议在使用前重新测定病毒滴度。
分装要求:必须分装为小体积(如每次实验用量),避免反复冻融。每次冻融可能导致滴度下降约10%。
解冻方法:使用时需冰浴缓慢融化,减少活性损失。
3. 超低温保存(液氮罐)
保存期限:在液氮罐中(-196℃)保存,可以显著延长病毒的存活时间,适合更长期的保存需求。
4. 冻干保存
保存期限:通过冻干技术将病毒干燥后保存,可以在常温下储存,但需要确保冻干过程不会影响病毒的活性。
5. 其他注意事项
避免反复冻融:反复冻融是滴度下降的主要原因,分装后可最大限度减少冻融次数。
缓冲液选择:使用适当的缓冲液(如PBS或基础培养基)可以提高AAV病毒的稳定性。
标签管理:需标注病毒种类、滴度、保存日期及实验信息,防止混淆。
AAV病毒的储存需根据实验需求选择条件:短期使用(1-3天)优先4℃存放,长期保存(6个月以上)必须分装后-80℃冷冻,同时严格避免反复冻融。若保存时间过长或条件不稳定,建议重新测定滴度以确保实验效果。