SCAAV(Self-Complementary AAV)和 SSAAV(Single-Stranded AAV) 的主要区别并不仅仅是 ITR(Inverted Terminal Repeat, 反向终端重复序列),它们在基因组结构、复制方式、转录效率等方面也有所不同:
1.基因组结构:
SCAAV(自互补 AAV):SCAAV 的基因组是双链 DNA,它通过删除包装限制区域(通常是 D 端)来使 AAV 基因组能够自我互补形成双链结构,因此不需要宿主细胞的 DNA 聚合酶来合成互补链。
SSAAV(单链 AAV):SSAAV 是传统的 AAV 形式,它的基因组是单链 DNA(ssDNA),进入细胞后需要依赖宿主细胞的 DNA 复制机制合成互补链,才能形成双链 DNA 进行基因表达。
2.ITR 结构:
SCAAV 的 ITR 被设计成能促进 DNA 自我互补,因此 SCAAV 载体通常会删除其中一部分 ITR,使基因组能环化形成双链 DNA。
SSAAV 载体的 ITR 结构完整,保证其单链 DNA 形式能够在细胞内高效形成双链。
3.基因包装能力:
SCAAV 由于其双链结构,占据了更多的 AAV 容量,因此它的载体基因大小一般不能超过 ~2.4 kb(比 SSAAV 低)。
SSAAV 可以携带更大的基因(最大接近 4.7 kb),因为它的基因组是单链 DNA。
4.基因表达效率:
SCAAV 由于自带双链 DNA,不需要额外的互补链合成,因此可以更快、更高效地启动基因表达,通常能实现更高的转录水平。
SSAAV 需要等待宿主细胞合成互补链,因此基因表达通常较慢,且表达水平可能较低。
虽然 ITR 结构在 SCAAV 和 SSAAV 之间有所不同,但它们的区别不仅限于 ITR。SCAAV 由于其双链结构,具有更快的基因表达和更高的效率,但基因包装能力较低;而 SSAAV 具有更大的基因包装能力,但依赖宿主细胞的复制机制来形成双链,因此基因表达效率较低。