知识分享

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AAV的基本结构是什么

AAV(腺相关病毒,Adeno-Associated Virus)是一种小型单链DNA病毒,广泛用于基因治疗和生物医学研究。AAV的基本结构包括以下几个主要部分: 1. 基因组 AAV的基因组是一个单链DNA,约4.7kb,包含以下关键区域: (1)反向末端重复序列(ITRs, Inverted Terminal Repeats): 位于基因组两端(5' 和 3' 末端),通常长度为145bp。 参与病毒基因组的复制、打包和整合。 是AAV唯一不可替代的部分,基因治疗载体中其他序列都可以被目标基因替换。 (2)Rep基因:...

AAV靶向肺部的血清型如何选择

在选择AAV靶向肺部的血清型时,需要考虑多个因素,包括血清型的转导效率、感染部位、免疫反应等。 以下是一些在肺部基因递送中常用的AAV血清型及其特点: 1.AAV1:AAV1在肺部上皮细胞中展示了较好的转导效果,尤其在气道上皮细胞中具有潜力。 2.AAV2:AAV2是最早研究的AAV血清型之一,但在肺部转导效率并不理想,受限于其依赖肝素硫酸蛋白多糖(HSPG)的细胞表面接受体。...

aav荧光蛋白载体

AAV荧光蛋白载体是一种利用腺相关病毒(AAV)作为载体,将荧光蛋白基因传递到宿主细胞中的工具。这种载体广泛应用于基因研究和神经科学中,用于标记、追踪和可视化特定细胞或蛋白质的表达和分布。以下是AAV荧光蛋白载体的一些关键应用和特点: 1.细胞标记:通过将特定荧光蛋白基因(如GFP、mCherry等)引入细胞,使目标细胞表达荧光蛋白,从而实现细胞标记和追踪。 2.神经回路追踪:在神经科学研究中,荧光蛋白对照AAV用于标记神经元,帮助科学家观察和追踪神经回路的结构与功能。...

慢病毒上清在4℃保存时,有哪些保存条件需要注意

慢病毒上清在4℃保存时,需要注意以下几个保存条件: 1.短期保存:如果在短时间内(一周内)使用慢病毒,可以将病毒置于4℃保存。建议在一周内使用完毕,以保持病毒滴度和活性。 2.避免反复冻融:反复冻融会降低病毒滴度,每次冻融可能会降低病毒滴度10%-50%。因此,应尽量避免反复冻融,并根据每次实验用量进行分装。 3。稀释后的保存:如果需要稀释病毒,稀释后建议在4℃保存,并尽量在3天内使用完毕以保证病毒滴度。 4.分装建议:为了减少反复冻融的影响,建议将病毒分装成小体积(如200 μL/tube)后保存于-80℃。...

什么是慢病毒载体?

慢病毒载体是一种基因转移工具,基于慢病毒(主要是HIV-1)改造而成,用于将特定基因导入哺乳动物细胞。慢病毒属于逆转录病毒家族,具有感染分裂和非分裂细胞的能力,因此被广泛用于基因治疗和基因研究。以下是关于慢病毒载体的核心特点和功能的详细说明: 一、特点 1.宽泛的宿主范围 慢病毒载体可以感染多种类型的哺乳动物细胞,包括分裂和非分裂细胞。 2.长期稳定表达 慢病毒载体在目标细胞中整合到宿主基因组,因此能够长期、稳定地表达所导入的基因。 3.较高的安全性...

慢病毒如何储存

慢病毒的储存方法如下: 1.短期储存:如果在短时间内(一周内)使用慢病毒,可以将病毒置于4℃保存。 2.长期储存:对于需要长期保存的慢病毒,建议将病毒分装后放置于-80℃。在-80℃条件下,慢病毒可以保存6个月以上。若超过6个月,建议在使用前重新测定病毒滴度。 3.避免反复冻融:反复冻融会降低病毒滴度,每次冻融可能会降低病毒滴度10%-50%。因此,应尽量避免反复冻融,并根据每次实验用量进行分装。 4.分装建议:为了减少反复冻融的影响,建议将病毒分装成小体积(如200 μL/tube)后保存于-80℃。...

慢病毒细胞转染是什么

慢病毒细胞转染(Lentiviral Transduction)是一种利用慢病毒载体将外源基因(如报告基因、治疗基因或基因编辑工具)导入到宿主细胞中的过程。慢病毒载体来源于慢病毒,这是一种逆转录病毒,能够将其RNA基因组逆转录成DNA并整合到宿主细胞的基因组中。 以下是慢病毒细胞转染的一些关键点: 1.逆转录过程:慢病毒载体在宿主细胞内将RNA基因组逆转录成DNA。 2。整合到宿主基因组:逆转录后的DNA可以整合到宿主细胞的基因组中,使得外源基因能够在宿主细胞中长期稳定表达。...

腺相关病毒AAV载体设计

腺相关病毒(Adeno-Associated Virus, AAV)是一种常用于基因治疗和基因功能研究的载体。AAV因其安全性高、免疫原性低和能够长时间表达目的基因而受到广泛关注。在设计AAV载体时,需要综合考虑多个因素以优化其效率和安全性。 以下是设计AAV载体的关键步骤和注意事项: 1. 选择AAV血清型 AAV有多种血清型(如AAV1-AAV9等),不同血清型具有不同的组织特异性和感染能力: AAV2:最常用的血清型,适合多种细胞和组织。 AAV9:对心肌和中枢神经系统具有高亲和力。 AAV8:具有高效的肝脏转染能力。...

腺相关病毒的组织嗜性

腺相关病毒(Adeno-associated virus, AAV)是一种小型的病毒,属于非致病性的病毒群体,广泛应用于基因治疗和其他生物医学研究。AAV通常感染人类和其他哺乳动物,它的组织嗜性指的是该病毒对于不同组织和器官的亲和力和感染倾向。 AAV的组织嗜性特点: 广泛的组织感染能力:AAV具有广泛的组织嗜性,可以感染多种组织,包括肝脏、肌肉、心脏、肺、神经系统等。在不同的细胞类型中,AAV的入侵与其表面蛋白(如VP1、VP2、VP3)以及其与细胞表面受体的结合有关。...

什么是慢病毒、腺病毒及腺相关病毒,他们在科研领域的主要应用和特点分别是什么?

慢病毒(LV)、腺病毒(AdV)和腺相关病毒(AAV)是三种在科研领域中常用的病毒载体,它们各自具有独特的特点和应用。 一、慢病毒(LV) 定义:慢病毒载体(Lentiviral vectors, LVs)是基于人免疫缺陷病毒(HIV-1病毒)改造而成的病毒载体系统,能高效地将目的基因(或RNAi)导入动物和人的原代细胞或细胞系,对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。...

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