知识分享

近期Signal Transduction and Targeted Therapy杂志（IF=40.5）上发表了一篇重量级AAV基因治疗综述文章（通讯作者为美国马萨诸塞大学Chan医学院的高光坪教授），深入探讨了AAV基因治疗的最新突破与未来趋势。这篇文章不仅汇聚了行业内的权威观点，更揭示了关键技术的最新动态，为学术界和产业界的创新提供了全新启发。我们将以系列文章的形式对这篇重量级综述进行分享。...

如果是研究小鼠模型，AAV-PHP.B或AAV-PHP.eB可能是有效的选择，但在灵长类动物或人体应用时，AAV9通常是首选。选择能够跨越血脑屏障（BBB）的腺相关病毒（AAV）血清型时，需考虑以下几个关键因素： 1. 血清型的穿透能力 不同的AAV血清型对血脑屏障的穿透能力差异很大。研究表明，以下血清型对BBB的穿透效果相对较好： AAV9：是最常见的能够跨越血脑屏障的血清型，广泛用于中枢神经系统（CNS）的基因疗法。 AAVrh10：穿透能力接近AAV9，且在某些脑区表达效果可能更好。...

针对内耳的基因递送，腺相关病毒（AAV）载体也具有重要的应用，不同的AAV血清型对内耳的不同细胞类型和结构具有特定的嗜性。以下是一些常用于内耳基因治疗的AAV血清型： 1. AAV2 AAV2是最早研究的AAV血清型之一，虽然它的全身递送效果有限，但对于内耳的某些类型细胞（如螺旋神经节神经元）具有较好的转导效果。AAV2能够通过局部注射到内耳的基底膜窗（round window membrane）有效转导内耳细胞。 2. AAV1 AAV1在内耳毛细胞（hair cells）中的转导效率较高，尤其是对外毛细胞（outer hair...

腺相关病毒（AAV）是一种常用的基因治疗载体，针对不同器官或组织的基因递送，选择合适的AAV血清型非常重要。不同的AAV血清型具有不同的组织嗜性（tropism），即它们偏好感染某些特定类型的细胞或组织。对于肺部的基因递送，常见的AAV血清型有几种，它们在肺部的转导效率不同。选择AAV血清型主要取决于靶细胞、给药途径和免疫因素等多方面。对于肺部基因治疗，AAV1、AAV5、AAV6和AAV9是常见的选择，而具体血清型的选择还需根据实验数据和治疗目标进行优化。 常用于肺部基因递送的AAV血清型：...

在外周神经系统（PNS）研究中，腺相关病毒（AAV）血清型的选择对于成功的基因递送非常关键。不同的AAV血清型具有不同的组织嗜性和感染效率，因此根据具体的实验需求选择合适的血清型是至关重要的。AAV9由于其较高的外周神经感染效率和穿过血脑屏障的能力，往往是首选。但具体的选择取决于研究目标、递送途径和实验动物模型等因素。以下是几个常见的AAV血清型及其在PNS中的应用特点： 1. AAV9 特点: AAV9是目前广泛用于中枢神经系统（CNS）和外周神经系统的血清型。它具有穿过血脑屏障的能力，同时也能有效感染外周神经。 应用:...

根据美国疾病控制中心的数据，近20%的儿童和青少年被认为是肥胖的。研究表明，肥胖可能会对多种健康状况产生显著影响，包括关节炎、心脏疾病和其他代谢问题，美国儿科学会现在推荐早期和强化治疗来对抗肥胖。在过去的四年里，圣路易斯的Shriners儿童医院的研究人员一直在开发一种新的方法来预防儿童肥胖的影响。 Shriners儿童医院圣路易斯研究主任Farshid Guilak博士和资深科学家Ruhang Tang博士发现了一种革命性的新方法-基因疗法，将有害的脂肪酸转化为有益的脂肪酸，使肥胖儿童能够降低其他健康问题的风险，特别是关节炎。...

腺相关病毒（AAV，Adeno-associated virus）载体是一种广泛应用于基因治疗和基因编辑的工具。AAV是基因治疗领域中应用最广泛的病毒载体之一，特别是在治疗遗传性疾病、神经系统疾病和眼科疾病方面。它的特点包括： 1. 低免疫原性和安全性 AAV是一种非致病性病毒，不会引起明显的免疫反应。它在人类中无致病性，因此在安全性上有较好的表现。 2. 长期基因表达 AAV载体可以将目标基因整合到宿主细胞中（主要是非整合方式存在），特别是在非分裂细胞中，如神经细胞、肝细胞等，能够实现长期的基因表达。 3. 不整合入基因组...

在已知的腺相关病毒（AAV）血清型中，某些血清型被发现具有跨越血脑屏障（BBB）的能力，特别是在全身给药的情况下。以下是几种具有跨血脑屏障潜力的AAV血清型： AAV9：这是目前研究最多、跨血脑屏障能力最强的血清型之一。AAV9被证明能够在全身静脉注射后有效地穿过血脑屏障，并广泛分布在中枢神经系统（CNS）中。这使得它成为治疗脊髓性肌萎缩症（SMA）等神经系统疾病的重要工具。 AAVrh10：AAVrh10也具有较好的跨血脑屏障能力，虽然不如AAV9那么广泛用于神经系统疾病的研究，但它在动物实验中显示出了潜力。...

质粒过表达是指通过质粒（质粒是一种小型的、环状的DNA分子）载体引入外源基因，使得宿主细胞内该基因的表达量显著增加的过程。质粒通常用于在细胞中实现基因的高水平表达，以便研究特定基因的功能或大量生产某种蛋白质。 质粒过表达的主要原理包括以下几个步骤： 质粒构建：首先，在实验室中构建一个含有目标基因的质粒载体。这个质粒通常含有以下几个关键元件： 启动子：控制基因的表达，通常使用强启动子（如CMV启动子）来保证目标基因的高效转录。 目标基因：即需要过表达的基因。...

腺相关病毒（AAV）的生产工艺通常涉及多个步骤，包括质粒构建、细胞培养、病毒包装、收集和纯化等。以下是AAV生产的一般流程图描述： AAV生产工艺流程 质粒构建 设计并合成包含目的基因的载体质粒（Transfer plasmid）。 准备包装质粒（Packaging plasmid）和包膜质粒（Envelope plasmid）。 转染细胞 将三种质粒共转染到适合的细胞系（如HEK293T细胞）中。 使用转染试剂（如PEI、脂质体）以提高转染效率。 病毒包装 在转染后，细胞内开始产生AAV颗粒。...