知识分享

慢病毒包装三质粒系统是一种广泛用于基因递送的技术，通过将慢病毒基因组的关键功能元件拆分到三个独立的质粒中，协同作用以产生复制缺陷型病毒颗粒。以下是其原理和优势的详细说明： 一、慢病毒包装三质粒系统原理 1.三质粒的组成： 包装质粒（Packaging Plasmid） 提供病毒的结构蛋白（Gag、Pol）和调控蛋白（Rev），但不含病毒包膜蛋白和基因组RNA的包装信号（Ψ），例如psPAX2。 包膜质粒（Envelope Plasmid） 提供异源包膜蛋白（如VSV-G），替代慢病毒原有的包膜蛋白，决定病毒的宿主范围。...

在基因治疗和分子生物学研究中，病毒载体是实现外源基因高效递送的核心工具。常见的病毒载体包括慢病毒（Lentivirus）、腺病毒（Adenovirus）、腺相关病毒（AAV）等。每种载体都有其独特的生物学特性和适用场景。 一、选择病毒载体的基本考量 在选择病毒载体时，研究者通常需要综合考虑以下几个方面： 靶细胞类型：不同载体对细胞的感染谱不同。例如，慢病毒能感染分裂和非分裂细胞，而AAV则在多种组织中表现出良好的转导效率。 转基因大小：不同病毒载体的包装容量有限。AAV的容量较小（约4.7 kb），这在某些应用中可能成为限制因素。...

CMV、EF1α 和 CAG 启动子都是在分子生物学和基因表达研究中常用的启动子，它们主要用于驱动外源基因在哺乳动物细胞中的表达。它们各自有不同的特点，适用于不同的应用场景。下面是它们的主要区别： 1. CMV 启动子（Cytomegalovirus promoter） 来源：人类巨细胞病毒（Human Cytomegalovirus） 强度：非常强，是目前使用最广泛的强启动子之一。 表达谱：广泛表达于多种哺乳动物细胞，尤其是在转染实验中表现很好。 缺点： 在某些类型的细胞中（如干细胞、神经细胞），CMV...

腺相关病毒（AAV）的反向末端重复序列（Inverted Terminal Repeat, ITR）是其基因组两端的对称重复序列，具有多种关键功能，具体如下： 1、复制起点与DNA合成 ITR包含病毒DNA复制的起始位点。其发夹结构允许病毒利用宿主细胞的DNA聚合酶进行链置换合成，形成双链DNA中间体。这一过程对病毒基因组的复制至关重要，尤其在辅助病毒存在时启动AAV的复制。 2、基因组包装信号...

腺相关病毒（AAV）之所以能够在不整合进宿主基因组的情况下实现长期基因表达，主要依赖于以下几个关键机制： 1. 形成稳定的游离体 AAV进入细胞核后，其单链DNA基因组通过宿主酶的作用转化为双链DNA，并形成环状的游离体（episome）。这种结构独立于宿主染色体存在，避免了整合导致的插入突变风险。附加体的稳定性在非分裂或缓慢分裂的细胞（如神经元、肌肉细胞、视网膜细胞）中尤为显著，因为细胞分裂会稀释游离体，而这类细胞的静息状态使得附加体得以长期保留。 2. 反向末端重复序列（ITR）的作用...

腺相关病毒（AAV）能够实现外源基因在转基因个体内长时间表达，主要依赖于其独特的生物学特性和优化的载体设计。 1. 游离体形式的稳定性 非整合特性：重组AAV载体去除了病毒自身的复制基因（rep和cap），仅保留反向末端重复序列（ITR）。这种设计使其以游离体（episome）形式稳定存在于宿主细胞核中，而非整合到宿主基因组中。 优势：避免了插入突变风险，同时游离体在非分裂细胞（如神经元、肝细胞）中可长期存在，减少因细胞分裂导致的载体丢失。...

AAV（腺相关病毒）作为基因治疗载体具有多方面的优势 1. 安全性高 AAV是一种非致病性病毒，没有已知的与之相关的疾病，因此在临床应用中表现出良好的安全性。 AAV载体可以被设计为不含任何病毒基因，仅包含治疗所需的外源基因，这进一步降低了潜在的致病风险。 2. 免疫原性低 AAV载体在体内引起的免疫反应较弱，这使得其在多次给药或长期治疗中更具优势。 低免疫原性减少了免疫排斥反应的可能性，降低了治疗过程中的副作用。 3. 基因表达持久...

AAV9（腺相关病毒9型）作为基因治疗中的重要载体，因其独特的生物学特性在多个方面展现出显著优势，尤其在靶向性、安全性及临床应用潜力上优于其他AAV血清型。 1. 卓越的血脑屏障穿透能力 神经疾病治疗的突破：AAV9的确是少数能够通过静脉注射穿越血脑屏障（BBB）的AAV血清型之一，在中枢神经系统（CNS）疾病治疗中非常重要。 鞘内注射增强效果：在遗传性痉挛性截瘫等疾病的治疗中，AAV9通过鞘内注射可进一步提高基因递送效率，直接作用于脊髓和脑组织。 2. 高效的心肌细胞转导...

1. 转导效率高 肝脏细胞转导：AAV8对肝脏细胞的转导效率极高，远高于其他AAV血清型。在多种动物模型（如小鼠、犬和非人灵长类动物）中，AAV8能够快速且高效地转导肝细胞。 肌肉细胞转导：在系统性给药后，AAV8是转导骨骼肌和心肌效率最高的血清型，因为它能够跨越血管屏障，而AAV1和AAV6等血清型则缺乏这一能力。 视网膜细胞转导：AAV8能够高效转导视网膜中的多种细胞类型，包括无长突细胞、Müller细胞和双极细胞等。 2. 免疫反应低...

派真生物（PackGene Biotech）深耕基因治疗领域服务平台逾十载,始终坚持做一家纯粹的CRO&CTDMO,以深厚的技术积累、卓越的运营和高品质的交付,为全球客户提供从早期概念验证、成药性评估到IIT、IND及BLA的一站式CMC服务。 我们的产品线广泛，涵盖AAV、慢病毒、质粒以及mRNA等多种基因治疗载体，满足不同客户的需求。发展至今,派真生物已成功协助合作伙伴以零发补获得10多个FDA和NMPA IND批件,成功交付数十个IIT项目。 1.技术优势...