知识分享

敲入细胞系(Knock-in cell lines)是通过基因编辑技术将外源DNA序列精确地插入到细胞基因组中的细胞系。相比于敲除细胞系，敲入细胞系可以实现精确的基因编辑和定向的基因修饰，为研究基因功能、细胞信号通路和疾病模型提供了重要工具。 建立过程： 设计敲入载体： 首先，需要设计合适的敲入载体，包括带有目标基因或修饰序列的质粒、病毒载体或RNA导向编辑复合物等。敲入载体的设计应考虑到目标基因的特异性和敲入位点的选择。 转染或转染：...

稳定细胞系(Stable cell lines)是指通过引入外源基因或RNA干扰等方法，使得细胞系在长时间培养过程中能够稳定地表达目标蛋白或RNA的细胞群体。建立稳定细胞系是细胞生物学和分子生物学研究中常用的手段之一，可以用于基因功能研究、蛋白表达和药物筛选等领域。 建立过程： 选择适当的载体： 首先，需要选择合适的载体来携带目标基因或RNAi序列。常用的载体包括质粒、病毒载体或质粒表达系统等。 转染或转染： 将选择的载体导入目标细胞中，可以通过转染(transfection)或者病毒转导(viral...

KO细胞系(Knockout cell lines)是指通过基因编辑技术敲除(Knockout)特定基因而获得的细胞系，是研究基因功能和细胞信号传导途径的重要工具。KO细胞系建立的成功与否直接影响着后续研究的可靠性和结果的解释性。 建立过程： 设计gRNA： 首先，需要设计目标基因的gRNA序列，以指导Cas9蛋白的靶向切割。gRNA的设计要求具有高的特异性和高效的切割效率。 基因编辑：...

随着基因编辑、疫苗研发和治疗领域的迅速发展，mRNA技术作为一种高效的基因表达和治疗手段备受关注。然而，mRNA的合成过程复杂且需要高水平的技术支持。在这个背景下，派真生物为研究人员提供了一站式的mRNA合成解决方案，帮助客户实现高效、可靠的mRNA合成。 派真生物的mRNA合成服务包括以下方面： 定制设计： 派真生物的专业团队将根据客户提供的mRNA序列和特定要求，进行定制设计。无论是标准mRNA、修饰mRNA还是长链mRNA，我们都能根据客户需求提供合适的解决方案。 优质材料：...

基因过表达是一种常用的基因调控策略，通过增加特定基因的表达水平来研究其功能和影响。然而，确定基因过表达效果的准确性和可靠性对于确保研究结果的可重复性和科学价值至关重要。本文将介绍基因过表达效果检测的方法和意义。 检测方法： 实时定量PCR（qPCR）： qPCR是常用的检测基因过表达效果的方法之一。通过测量目标基因的mRNA水平，可以确定基因过表达的程度。相比于传统PCR，qPCR具有更高的灵敏度和准确性。 Northern blotting： Northern...

基因沉默是基因表达调控的重要方式，通过抑制特定基因的表达来研究其功能和影响。然而，确定基因沉默效果的准确性和可靠性对于保证研究结果的可重复性和科学价值至关重要。本文将介绍基因沉默效果检测的方法和意义。 检测方法： 实时定量PCR（qPCR）： qPCR是常用的检测基因沉默效果的方法之一。通过测量目标基因的mRNA水平，可以确定基因沉默的程度。相比于传统PCR，qPCR具有更高的灵敏度和准确性。 Northern blotting： Northern...

基因敲除是一种常用的基因编辑技术，用于研究特定基因的功能和影响。然而，确定基因敲除效果的准确性和可靠性对于确保研究结果的可重复性和科学价值至关重要。本文将介绍基因敲除效果检测的方法和意义。 检测方法： PCR分析： PCR是常用的检测基因敲除效果的方法之一。通过设计特异性引物，可以检测目标基因是否成功被敲除。正常情况下，目标基因的PCR产物会消失或出现明显的变化。 Southern blotting： Southern...

腺相关病毒(AAV)作为一种重要的基因传递工具，在基因治疗和基因编辑领域发挥着关键作用。然而，不同的AAV血清型在载体转染效率和组织特异性方面存在差异。因此，进行AAV血清型的筛选和选择是实现高效基因传递的关键一步。 筛选流程： 构建AAV载体库： 首先，需要构建包含不同AAV血清型的载体库。这些载体通常包含AAV基因组、包装所需的Rep和Cap基因以及目标基因。 AAV包装： 将构建好的AAV载体转染至适当的细胞系中，以包装AAV颗粒。通常使用HEK293细胞进行AAV包装，然后通过裂解提取AAV颗粒。 AAV血清型鉴定：...

近年来，基因编辑技术的快速发展为研究人员提供了强大的工具，用于研究基因功能和疾病治疗。在体敲除技术是基因编辑领域的一个重要分支，而AAV-SaCas9(受体相关蛋白结合的Cas9)作为一种有效的基因编辑工具，在体敲除方面显示出了巨大的潜力。 AAV-SaCas9简介： AAV-SaCas9是一种基于腺相关病毒(AAV)载体介导的Cas9蛋白，其活性来源于受体相关蛋白结合的Cas9(SaCas9)。相比于传统的SpCas9(史前蛋白结合的Cas9)，SaCas9体积更小，因此更适合用于AAV载体传递。...

腺相关病毒(AAV)作为一种有效的基因传递工具，在基因治疗、基因编辑和生物医学研究领域发挥着重要作用。而AAV包装技术是将目标基因导入AAV颗粒的关键步骤之一。针对科研人员在AAV包装方面的需求，提供专业的AAV包装技术服务可以加速科研创新，推动生命科学领域的发展。 派真生物提供的AAV包装技术服务： 质粒构建： 派真生物的专业团队能够根据客户提供的基因序列，构建质粒，并确保质粒设计合理、功能完整。 细胞培养和转染： 我们采用先进的细胞培养技术，将构建好的质粒转染至适当的宿主细胞中，启动AAV基因组的复制和包装过程。...