慢病毒载体进行基因过表达，构建稳转细胞株，研究己糖激酶在前列腺癌（PCa）中的作用

1. 什么是慢病毒

慢病毒是以HIV-1为基础改造而来的一种病毒载体。在数十年的应用中，慢病毒载体的生物安全性和有效性不断被提升，目前已经成为体内外生物实验中一种功能非常强大的基因递送工具。

在基因递送方面，慢病毒载体拥有诸多独特的优势：稳定持久表达、可感染多种类型细胞、可携带大片段基因、免疫原性比较低等。无论是基础科研还是临床应用，慢病毒载体都具有非常广泛的应用前景。

2. 慢病毒的应用场景

目前慢病毒载体主要应用在以下几个方面：

• 细胞基因治疗（已上市的CAR-T产品有9款采用了慢病毒载体递送CAR基因）
• 基因表达调控（过表达、RNA干扰研究等）
• 基因编辑（CRlSPR/Cas9 gRNA文库筛选、基因敲除、敲入、点突变、基因激活/抑制）
• 稳转细胞株构建
• 活体细胞成像追踪
• 转基因动物

图1 慢病毒载体的主要应用方向

细胞代谢在肿瘤进展中起着关键作用，靶向癌症代谢可能有效地杀死癌细胞。本文旨在研究己糖激酶在前列腺癌（PCa）中的作用，并确定PCa治疗的关键靶点。

实验设计和主要研究结果：

（1）癌症基因组图谱（TCGA）数据库和在线工具评估结果显示ADP依赖型葡萄糖激酶（ADPGK）是唯一一种在前列腺腺癌（PRAD）中上调并预测较差总生存（OS）的葡萄糖激酶。临床样本分析显示，与非PCa组织相比，DPGK在PCa组织中显著上调。

（2）ADPGK过表达促进了PCa细胞的增殖和迁移，而敲低ADPGK则抑制了恶性表型。

（3）代谢组学、蛋白质组学以及ECAR和OCR测试揭示了ADPGK显著加速了PCa的糖酵解。

（4）ADPGK与丙酮酸激酶C（ALDOC）结合，通过AMP激活蛋白激酶（AMPK）磷酸化促进糖酵解。

图2 用于ADPGK过表达的慢病毒结构示意图及ADPGK过表达结果

派真生物有幸为以上研究提供慢病毒。