慢病毒(Lentivirus)之所以能“发光”,是因为在构建慢病毒载体时,科学家人为地将绿色荧光蛋白(GFP, Green Fluorescent Protein)基因插入到了病毒的基因序列中,并由启动子驱动表达。具体来说:
🧬 为什么慢病毒会发光(表达GFP)?
- GFP不是病毒天然携带的基因,而是人工构建的慢病毒载体中添加的标记基因。
- 当这种携带了GFP的慢病毒感染细胞后,会将其基因组(包括GFP)整合到宿主细胞的DNA中。
- 在启动子的驱动下(如CMV、EF1α等),GFP在宿主细胞中被转录和翻译,产生绿色荧光蛋白。
- 在荧光显微镜下,可以观察到细胞发出绿色荧光,从而判断病毒感染效率或基因表达情况。
✅ 应用场景
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检测慢病毒感染效率
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追踪基因转染的细胞群
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细胞标记和分选(如流式细胞术)
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构建稳定表达细胞株
GFP只是一个标记基因,也可以换成RFP(红色荧光蛋白)、YFP(黄色)、Luc(荧光素酶)等。
GFP表达的强弱也能一定程度反映转基因的表达水平。