受国内相关激励政策和技术发展等多方面因素驱动，基因治疗目前已逐步进入高端商业定制化时代。截至2022年末，全球已有6款AAV基因治疗药物获批上市，同时还有数百款产品进入了临床I期和II期。在未来的3-5年有望看到基因与细胞治疗药物的大规模上市。但是，现有的AAV质量控制检测和表征技术尚未完全成熟，许多基因治疗药物需要全面严谨的分析检测方法来表征AAV和证明其安全性和有效性。这也是从研究到临床开发再到获批的成功转化的关键组成部分。
基于上万批次的AAV放行检测成功经验，派真生物率先完成分析方法学开发和方法学验证，并积累了多个项目执行经验。特别是关键的检测项目，如感染滴度（TCID50）、AUC空壳率检测和rcAAV检测等。派真以客户需求为导向，建立了一站式临床前生物药物分析检测服务平台，拥有庞大的数据库，覆盖方法开发、方法验证、批放行检测，能为产品的中间控制和终产品的放行提供全面完善的检测服务，具有包括细胞库、菌株库、质粒、AAV在内的健全的质量标准体系，为满足客户在成药性研究，质量研究，质量控制等方面提供专业的技术支持，能够满足客户不同分析方法开发的需求。派真已成功服务数个IND申报的GMP批放行检测，为AAV基因药物的安全性和有效性保驾护航。
| 类别 | 检测项目 | 检测方法 |
|---|---|---|
| 鉴别 | 特征序列鉴定 | 一代测序、三代测序、PCR |
| 衣壳蛋白鉴别及纯度 | SDS-PAGE、毛细管电泳、ELISA、HPLC MS | |
| 纯度 | UV纯度 | UV |
| AAV纯度 | AEX-HPLC | |
| 空壳率 | AUC、AEX HPLC、SEC MALS、 cyroTEM、TEM | |
| 聚集 | SEC-HPLC、DLS | |
| 效价/滴度 | 基因组滴度 | qPCR、ddPCR |
| 衣壳滴度 | ELISA | |
| 效价-感染性 | TCID50或其他感染滴度检测方法 | |
| 效价-基因表达 | 基于细胞的体外mRNA表达或蛋白表达（qPCR、ELISA、Western blot） | |
| 效价活性 | 基于细胞的体外生物学活性、动物实验 | |
| 杂质 | 宿主细胞DNA残留 | qPCR、ddPCR |
| 残留DNA片段大小分布 | qPCR、毛细管电泳 | |
| 宿主细胞蛋白残留 | ELISA、HPLC-MS | |
| 宿主细胞E1A残留 | qPCR、ddPCR | |
| 质粒DNA残留 | qPCR、ddPCR | |
| 牛血清白蛋白残留 | ELISA | |
| 核酸酶残留 | ELISA | |
| 亲和配基残留 | ELISA | |
| 碘克沙醇残留 | HPLC | |
| 转染试剂残留 | HPLC | |
| 吐温20残留 | HPLC | |
| TritonX100残留 | HPLC | |
| 安全性 | 无菌检查 | 薄膜过滤法 |
| 细菌内毒素 | 凝胶法、显色基质法 | |
| 支原体检查 | 培养法、DNA染色法、qPCR | |
| 复制型AAV（rcAAV） | 基于细胞培养的rcAAV检测 | |
| 异常毒性 | 动物实验 |
（部分检项）
| 类别 | 检测项目 | 检测方法 |
|---|---|---|
| 鉴别 | 质粒限制性酶切图谱 | 凝胶电泳法 |
| 质粒序列鉴定 | 一代测序 | |
| 残留 | 质粒浓度 | UV |
| DNA同质性（超螺旋比例） | HPLC | |
| 宿主蛋白残留（大肠杆菌） | ELISA | |
| 安全性 | 无菌检查 | 薄膜过滤法 |
| 细菌内毒素 | 凝胶法、显色基质法 |
| 服务货号 | 检测项目 | 检测方法 |
|---|---|---|
| DT001 | 基因组滴度 | ddPCR |
| DT002 | 衣壳浓度 | ELISA |
| DT003 | 感染滴度 | TCID50 |
| DT023 | rcAAV检查 | 基于细胞培养 的rcAAV检测 |
| DT026 | 空壳率 | AUC |
| DT025 | AAV基因组序列分析 | TGS |
| DT024 | AAV基因组完整性 | CE |
| DT004 | 衣壳蛋白鉴别及纯度 | SDS-PAGE |
| DT005 | 衣壳蛋白纯度 | CE-SDS |
| DT006 | AAV纯度及空壳率 | AEX-HPLC |
| DT007 | AAV纯度及聚集 | SEC-HPLC |
| DT008 |
AAV衣壳肽图分析 | LC-MS |
| DT009 | AAV衣壳完整蛋白 分子量及比例分析 | LC-MS |
| DT010 | 293宿主细胞DNA 残留 | qPCR |
| DT011 | 293宿主细胞DNA 片段大小分布 | qPCR、CE |
| DT012 | 质粒DNA残留 | qPCR |
| DT013 | 宿主细胞E1A残留 | qPCR |
| DT014 | 宿主细胞蛋白残留 | ELISA |
| 服务货号 | 检测项目 | 检验描述 |
|---|---|---|
| DV001 | 分析方法开发/验证：基因组滴度 | 针对GOI设置基因组滴度方 法并进行方法的开发与验证 |
| DV002 | 分析方法开发/验证：感染滴度 | 针对GOI设置TCID50方法并 进行方法的开发与验证 |
| DV003 | 分析方法开发/验证：rcAAV检查 | rcAAV检查的方法学开发、验证 |
| DV004 | 分析方法开发/验证：衣壳分析 | AAV衣壳分析（AUC）的方法学 开发、验证 |
| DV005 | 分析方法开发/验证：衣壳分析 | AAV衣壳分析（AEX-HPLC） 的方法学开发、验证 |
| DV006 | 分析方法开发/验证：AAV基因表达量 | AAV基因组表达量的分析 方法开发、验证 |
| DV007 | 分析方法开发/验证：AAV生物学活性 | AAV生物学活性的分析方 法开发、验证 |
| DV008 | 分析方法确认：无菌检查 | 按照Ch.P 1101或者USP31-71 进行无菌检查方法学确认 |
03
