AAV作为一种常用的基因转染工具，已被广泛应用于生命科学领域的基础研究和临床应用中。在使用AAV进行研究时，选择恰当的AAV血清型、启动子以及注射方式是实验顺利开展的必备条件。
为了大家能够顺利进行AAV动物实验，本期我们为大家带来AAV血清型、启动子、注射方式选择策略，帮助各位研友获得理想实验数据。
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血清型与启动子推荐
不同AAV血清型具有不同的衣壳蛋白空间结构、序列和组织特异性，因而其识别与结合的细胞表面受体也相应有很大差别，这也导致不同血清型转染的组织类型、细胞类型和感染效率也各不相同。
因此将组织特异性启动子的靶向转录能力与特异性AAV血清型结合，靶向组织或细胞，进行目的基因表达，从而达到研究特定器官组织的疾病机制和精准治疗目的。
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AAV注射方法及用量推荐
AAV注射方法对组织器官的转染效果也有很大影响，AAV注射方法可以为系统性注射和原位注射两种。采用相同的注射方法注射不同的AAV血清型，其组织分布也不相同。
由于使用的AAV血清型、注射方式、靶器官、目的基因的表达强度、需要观察的现象不同，AAV使用量也不一致。因此，如果希望能在一轮实验中得到理想的实验结果，建议在实验设计中设置不同的AAV用量组。
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常用注射方式
接下来我们将为大家分别介绍AAV动物实验常用的注射方法。在具体实验中，可根据不同实验目的和注射部位选择合适的给药方式。
尾静脉注射（系统内注射）
固 定：将小鼠固定在固定器或手背上，左手拇指、食指将小鼠尾巴拉直固定，并适当安抚。
扩张血管：用酒精棉球擦拭小鼠尾巴，使血管扩张，或者用热水浸泡，直至发红。注射状态为小鼠尾巴发白，紧靠发白小鼠尾骨两侧可以见两根红色静脉。
进 针：左手捏住小鼠尾巴末端1/3或1/4处，右手持注射器，针头与静脉小于30度进针， 若进针畅通无阻，则说明针头在血管内。
注 射：检查针管内有无回血，如有回血，则可以注射药物，推药时要匀速缓推。
止 血：用棉球按压注射点 1 min 左右止血。将小鼠从固定器上取下，放回笼中。
颞/面静脉注射
将一只幼崽直接放在湿冰上30-60秒，以麻醉动物。由于存在低温相关并发症（包括心室颤动，组织缺氧和代谢性酸中毒）的风险，请勿将动物置于冰上太久。文章中告知，30-60秒足以减缓小鼠运动以方便注射。如果需要更深的麻醉，可用吸入剂如1-2％的异氟烷;
当动物在冰上时，向注射器中加入30μl伊文思蓝染料;
当动物完全麻醉时（仍然呼吸但在冰上缺乏运动），在显微镜下移动它。右手注射时，将对着动物的枪口朝向右侧。将左手食指放在枪口上，左手中指放在耳塞尾部，使耳塞位于食指和中指之间;
检查耳朵前方的毛细血管，识别颞/面静脉，找到毛细管下方的暗阴影静脉，毛细管保持固定。颞静脉呈阴影状，向腹侧背侧，进入颈静脉;
进入颞静脉，针斜面向上。如果正确插入，可以通过皮肤观察到针斜角填充血液。慢慢压下柱塞，注意静脉沿着脸部侧面;
让针头在静脉内保持10-15秒，以防止注射剂回流。
资料来源：《Intravenous Injections in Neonatal Mice》, doi:10.3791/52037