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包装好的AAV（腺相关病毒）的储存时间主要取决于保存条件。以下是不同储存方式下的保存期限及注意事项： 1. 短期保存（4℃） 保存期限：AAV病毒在4℃下可以短暂存放 1-3天，建议尽快使用以确保病毒活性。 适用场景：适用于实验操作中的短期存放（如运输或待用），但不适合长期保存。 2. 长期保存（-80℃） 保存期限：分装后于-80℃冷冻可保存 6个月至1年。如果储存时间超过6个月，建议在使用前重新测定病毒滴度。 分装要求：必须分装为小体积（如每次实验用量），避免反复冻融。每次冻融可能导致滴度下降约10%。...

包装好的慢病毒（Lentivirus）的储存时间主要取决于保存条件，以下是不同储存方式下的稳定性及注意事项： 1. 短期保存（4℃） 保存期限：4℃下可短暂存放 1-7天，但建议在 1-3天内使用完毕，超过一周病毒活性会显著下降。 适用场景：适用于实验操作中的短期存放（如运输或待用），但需尽快使用以确保转导效率。 缓冲液影响：若病毒悬浮于含保护剂（如10%血清或蛋白）的缓冲液（如DMEM、PBS），可略微延长保存时间，但仍不建议长期存放。 2. 长期保存（-80℃）...

腺相关病毒（AAV）作为病毒载体在基因治疗中具有诸多优势，以下是其主要特点： 1. 安全性高 AAV是一种非致病性病毒，目前尚未发现其对人体有致病性。 AAV载体在宿主细胞中不会整合到宿主基因组中，避免了插入突变的风险。 AAV载体经过改造后，不含任何病毒基因，不会引发活跃的病毒基因表达，从而降低了免疫反应。 2. 免疫原性低 AAV载体在局部大剂量感染肌肉、脑、眼等组织时，不易引发免疫反应。 AAV的免疫反应和致敏率较低，适合长期基因表达。 3. 表达时间长...

AAV-PHP.eB是一种新型的腺相关病毒（AAV）载体，主要用于中枢神经系统（CNS）的基因治疗。它是基于AAV9改造而来的，具有以下特点： 1.高效的血脑屏障穿透能力：AAV-PHP.eB能够更有效地穿过血脑屏障（BBB），从而在中枢神经系统中实现更高的转导效率。这使得它在需要跨越BBB的基因治疗中比AAV9更具优势。 2.更高的中枢神经系统转导效率：在小鼠模型中，AAV-PHP.eB的全脑转导效率比AAV9高数倍。它能够更均匀和强效地传递基因载体到大脑和脊髓。...

在慢病毒感染实验中，对照病毒的使用具有重要意义，主要用于评估实验病毒的感染效率、验证实验结果的特异性以及确定实验操作的可靠性。以下是对照病毒在慢病毒感染中的具体使用方法和作用： 1. 对照病毒的类型 阴性对照慢病毒：通常不携带目标基因或特定序列，用于观察无特定基因干预时细胞的状态。 空载体对照慢病毒：仅携带基本的载体骨架，但不包含目标基因或报告基因，用于评估载体本身对细胞的影响。 报告基因对照慢病毒：如携带绿色荧光蛋白（GFP）或红色荧光蛋白（RFP）的慢病毒，用于评估感染效率和细胞转导效果。 2. 对照病毒的作用...

近年来，生物治疗方法在疾病治疗中取得了显著进展，尤其是抗体药物、mRNA技术和基因治疗的应用，为许多难治性疾病带来了新的希望。然而，抗体药物需要频繁重复给药，mRNA递送虽然具有快速生产的优势，但其瞬时表达特性也限制了其长期疗效。在这样的背景下，腺相关病毒（AAV）递送抗体作为一种新兴的治疗策略，正在成为基因治疗领域的热点研究方向。本文将探讨AAV递送抗体的潜力，并分析其如何解决现有生物治疗方法的痛点。   未满足的临床需求与现有治疗方法的痛点 抗体药物的重复给药问题 ...

检测腺相关病毒（AAV）病毒产品的纯度通常需要结合多种分析方法，以确保去除杂质并保证产品的安全性和有效性。以下是常见的检测方法： 1. SDS-PAGE和银染 目的：分析AAV病毒衣壳蛋白的组成和完整性。 方法：通过SDS-PAGE电泳分离VP1、VP2和VP3蛋白（相对分子量分别约为87、72和62 kDa），然后进行染色。 结果：纯度高的AAV样品应呈现三条清晰的蛋白带。 2. Western Blot 目的：检测AAV衣壳蛋白的特异性和纯度。 方法：使用针对AAV衣壳蛋白的抗体（如抗VP1/VP2/VP3抗体）进行免疫检测。...

慢病毒转染效率低可能由多个环节的问题导致，需从病毒生产、靶细胞状态、感染条件等多方面排查。以下是可能原因及解决方案的总结： 一、病毒生产环节 质粒质量差 原因：质粒不纯（如内毒素污染）或突变。 解决：使用高纯度质粒（如CsCl梯度离心或商业质粒试剂盒），避免反复冻融。 包装质粒比例不当 原因：转移质粒、包装质粒、包膜质粒比例失衡。 解决：优化比例。 生产细胞状态不佳 原因：HEK293T细胞传代次数过多、支原体污染或培养条件不佳（密度、营养）。 解决：使用低代次细胞，定期检测支原体，维持细胞处于对数生长期。 转染效率低...

慢病毒感染后细胞生长不好，可能有以下几方面原因： 1.病毒本身特性 病毒毒性：慢病毒本身对细胞有一定毒性，尤其当感染复数（MOI）过高时，会加重细胞代谢负担，甚至导致细胞死亡。 病毒纯度问题：如果慢病毒溶液中残留杂质蛋白、内毒素等，会对细胞造成毒性，影响细胞生长。 2.基因表达干扰 外源基因干扰：慢病毒携带的外源基因插入宿主基因组后，可能干扰关键基因的表达，影响细胞的正常生长和存活。 基因表达强度：如果外源基因表达强度过高，可能会对细胞的代谢和生理功能产生负面影响。 3.细胞自身因素...

慢病毒（如 HIV）感染细胞后，是否会继续分泌病毒取决于病毒的类型、载体设计以及宿主细胞的特性。一般来说，有以下几种情况： 1.野生型慢病毒（如 HIV） 感染宿主细胞（如 T 细胞、巨噬细胞）后，会在细胞内进行复制，并通过出芽的方式释放子代病毒，从而继续感染其他细胞。 这些病毒可以在一定时间内持续分泌，特别是在免疫系统无法有效控制感染时。 2.实验室构建的慢病毒载体 研究中常用的慢病毒载体（如第三代慢病毒系统）通常是复制缺陷型（replication-deficient），即它们缺乏病毒关键的结构基因（如...