知识分享

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慢病毒载体与逆转录病毒的区别

慢病毒载体(Lentiviral vector)和逆转录病毒(Retrovirus)都属于逆转录病毒科,但它们有一些关键区别,主要体现在以下几个方面: 1. 病毒家族和种类 慢病毒:属于逆转录病毒科中的一个亚类,典型代表是人类免疫缺陷病毒(HIV)。慢病毒载体是基于HIV或类似病毒改造而来。 逆转录病毒:是一个更广泛的分类,包括慢病毒和其他类型的逆转录病毒,如γ逆转录病毒(比如鼠白血病病毒,MLV)。 2. 感染细胞类型...

慢病毒作为基因递送工具,有哪些优势和劣势?

慢病毒(Lentivirus)作为基因递送工具在基础研究和临床应用中有广泛应用。以下是其主要优势和劣势: 慢病毒载体优势: 1.感染范围广 慢病毒可以感染分裂细胞和非分裂细胞(如神经元、肝细胞等),与一些只能感染分裂细胞的病毒(如腺病毒)相比,适用范围更广。 2.持久表达 慢病毒的基因组可以整合到宿主细胞的基因组中,从而实现目标基因的长期稳定表达,适用于需要长期基因表达的研究或治疗。 3.包装能力较大 慢病毒载体可以容纳大约 8 kb 的外源基因,满足绝大多数基因的递送需求。 4.低免疫原性...

慢病毒表达载体具有哪些特点

慢病毒表达载体是一种常用的基因表达工具,特别适用于基因治疗和基础研究中的基因导入和表达。以下是慢病毒表达载体的主要特点: 1.高效的基因转导能力 慢病毒载体可以高效感染分裂和非分裂细胞,包括神经元、干细胞和免疫细胞等,这使其在很多难以感染的细胞类型中表现出明显优势。 2.长期稳定表达 慢病毒能够将目的基因整合到宿主细胞基因组中,从而实现基因的长期稳定表达,非常适合研究需要长期基因表达的项目。 3.载体容量大 慢病毒载体具有较大的基因包装能力(通常为8–10 kb),可以容纳较大的外源基因及其调控元件。 4.低免疫原性...

腺相关病毒是什么病毒

腺相关病毒(Adeno-Associated Virus,简称 AAV)是一种小型、非包膜的单链 DNA 病毒,属于 细小病毒科(Parvoviridae) 和 Dependoparvovirus 属。它以需要辅助病毒(如腺病毒或单纯疱疹病毒)协助才能完成复制而得名。没有辅助病毒时,AAV会进入细胞并潜伏下来,但不进行复制。 特点: 1、无致病性 AAV对人体和其他动物基本无致病性,因此被认为是非常安全的病毒载体。 2、基因递送工具...

腺相关病毒结构和基因组

腺相关病毒(AAV)属于细小病毒科的依赖病毒属,单链DNA病毒,是最小、最简单的动物病毒;AAV病毒颗粒无包膜,结构由直径约20-26nm的二十面体蛋白质衣壳和4.7 kb左右的单链DNA基因组组成,如下图,基因组中包含有三个启动子(P5、P19、P40),两端是两个T形反向末端重复序列(ITR),其末端主要用作病毒复制起点和包装信号;rep基因编码病毒复制所需的四种蛋白质:分别为Rep78、Rep68、Rep52和Rep40;cap编码的VP1,VP2,VP3是装配成完整病毒所需要的衣壳蛋白。...

腺相关病毒(AAV)体内注射纯化的目的是什么?

AAV(腺相关病毒)体内注射前进行纯化的目的是为了确保病毒载体的质量、安全性和功能性,从而提高实验或治疗的效果,避免潜在的副作用。具体来说,AAV纯化的主要目的包括以下几点: 去除杂质 在AAV生产过程中,可能存在未包装的病毒基因组、宿主细胞蛋白质、DNA、培养基残留物等杂质。这些杂质会影响AAV的安全性,可能引起免疫反应或其他不良反应。 提高病毒滴度 纯化可以浓缩病毒颗粒,从而提高病毒的滴度。这对于治疗或实验中需要特定剂量的病毒载体至关重要。 确保病毒颗粒的功能性...

为什么很少用AAV做细胞感染,而更适合做动物实验

腺相关病毒(AAV)是一种常用的基因载体,在基因治疗和研究中具有重要应用。然而,AAV在细胞感染和动物实验中的使用存在一些差异,主要原因包括以下几点: 1. AAV感染效率 对细胞的感染效率较低:AAV对某些体外培养的细胞(尤其是某些难以感染的细胞类型,如干细胞或特定的肿瘤细胞)的感染效率往往不高。这是因为AAV的感染依赖于特定的受体(如AAV2依赖于整合素和肝素硫酸蛋白聚糖),而这些受体在某些细胞中可能表达较低或缺乏。...

腺相关病毒(AAV)载体的制备

腺相关病毒(Adeno-associated virus,AAV)属于细小病毒科,Dependoparvovirus属,病毒表面由衣壳蛋白VP1,VP2,VP3总共60拷贝,按1:1:10比例组成的二十面体结构,无包膜,直径约26nm。衣壳蛋白的不同突变型产生了不同的AAV亚型,按血清试验结果可以分为不同血清型,目前已有超过10种AAV血清型(AAV1~AAV10)。...

腺相关病毒(AAV)载体的原理

AAV载体的原理 腺相关病毒(Adeno-Associated Virus,AAV)载体是一种被广泛用于基因递送的工具,其主要功能是将特定的基因载荷传递至目标细胞和组织中。AAV载体具有一系列突出的特点,包括低免疫原性、广泛的细胞感染能力以及稳定的基因表达水平。 AAV基因组结构 AAV属于小型非包膜DNA病毒,其基因组大小约为4.7 kb。AAV基因组的两端分别存在反向末端重复序列(Inverted Terminal...

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