知识分享

腺相关病毒（AAV，Adeno-Associated Virus）是一种广泛用于基因治疗的病毒载体，与其基因相关的主要是 rep 基因 和 cap 基因。具体来说： 1、rep 基因： 编码病毒复制所需的蛋白质，负责调控病毒DNA复制、包装以及基因表达。 不同的血清型之间，rep 基因通常具有较高的保守性。 2、cap 基因： 编码病毒衣壳蛋白，包括 VP1、VP2 和 VP3，这些蛋白决定了病毒的血清型和其与宿主细胞表面受体的结合能力。 AAV的不同血清型主要是由 cap...

与其他病毒载体（如腺病毒或慢病毒）相比，AAV（腺相关病毒）具有以下独特的优点： 1、高安全性：AAV迄今从未发现野生型对人体致病，重组AAV去除了大部分的野生型AAV基因组元件，只有ITR序列，进一步保证了安全性。 2、低免疫原性：AAV感染组织后很少会被免疫系统清除，进行动物实验时造成的免疫反应小。 3、宿主范围广：AAV可以感染广泛的哺乳动物并且成功应用于人类和非人类蛋白的表达，不仅可转染分裂细胞，也可转染非分裂细胞。...

慢病毒（如HIV）的稳定性受到多种因素的影响，包括温度、湿度和环境条件。通常，在37°C的温度下，慢病毒的活性相对较短。研究表明，HIV在体外环境中，在37°C下存活的时间可能仅为数小时至几天，具体时间取决于环境的其他条件。 在体外，慢病毒在液体或生物体液中存活的时间较长，而在干燥表面上则会迅速失去活性。因此，病毒的存活时间并不是固定的，受到多种因素的影响。...

昨天2024年11月18日，美国食品和药物管理局（FDA）为细胞和基因疗法产品开发者提供的最新的指导方针草案，这份 FDA 文件是为行业提供关于如何开发细胞和基因治疗产品的常见问题解答（FAQ）。文件中的这36个问题内容涵盖从申请过程、与FDA互动、产品开发考虑因素、非临床研究到人体试验等方面提供详尽的建议和信息，并提供 FDA 与该领域相关的最佳实践建议。...

腺相关病毒（AAV）具有多种血清型，其不同的血清型主要基于病毒衣壳蛋白的抗原性差异。这些差异使得不同血清型在组织感染能力（即组织嗜性）、免疫反应及基因传递效率上有所不同，因此被广泛用于基因治疗中针对不同疾病和组织的应用。 常见的AAV血清型及其功能和应用 以下是一些主要的AAV血清型及其特点： 1. AAV1 特点：高效感染横纹肌（如骨骼肌、心肌）。在中枢神经系统（CNS）和呼吸系统组织中表现出中等感染效率。 应用：用于治疗肌肉相关疾病（如杜氏肌营养不良症）。适合局部基因递送到心脏或骨骼肌。 2. AAV2...

不同血清型的AAV对细胞、组织和器官的亲和性如下： 1.AAV1：主要靶向骨骼肌、心肌和中枢神经系统（CNS）。 2.AAV2：具有广泛的组织感染性，尤其适用于肌肉、肝脏、眼睛等靶组织，但也因存在广泛的抗体反应，体内应用受到限制。 3.AAV3：主要靶向肌肉、肝脏、肺和眼睛。 4.AAV4：主要靶向中枢神经、肌肉、眼睛和脑。 5.AAV5：对肺、眼睛、中枢神经和关节滑膜、胰腺有较好的感染效率。 6.AAV6：主要靶向肺、心脏，也对骨骼肌、心肌和呼吸道上皮有较强的亲和性。 7.AAV7：主要靶向肌肉和肝脏。...

慢病毒、腺病毒和腺相关病毒（AAV）是常用的基因传递载体，其表达特性因载体类型和实验条件而异。 以下是这三种病毒的表达时间特点： 1. 慢病毒 (Lentivirus) 表达启动时间：通常在转染后 48-72小时 开始观察到基因表达。 表达持续时间：慢病毒整合到宿主基因组，因此可以实现 长期稳定表达，特别是在分裂细胞和非分裂细胞中均有效。 特点：适合长期研究，尤其是在体外细胞或体内动物模型中需要持续表达的实验。 2. 腺病毒 (Adenovirus) 表达启动时间：较快，通常在感染后 24-48小时 开始观察到基因表达。...

慢病毒载体是一种基因工程工具，常用于基因过表达或基因敲低的实验。其实现基因过表达的原理可以分为以下几个步骤和机制： 1. 载体设计与基因插入 目的基因克隆：将目标基因（需要过表达的基因）插入到慢病毒载体的基因表达框架中，通常与一个强启动子（如 CMV、EF1α 或 Ubiquitin 启动子）相连，确保高效转录。 荧光标记/筛选基因：常添加荧光蛋白（如 GFP 或 RFP）或抗性基因（如 puromycin 抗性基因）作为筛选标记，方便监测感染效率。 2. 慢病毒载体的包装 包装系统：慢病毒载体通常分为三组功能元件：...

慢病毒（Lentivirus）是一种基因载体，在基因治疗中有着广泛的应用，主要基于其高效、稳定的基因转导能力和持久的表达特点。 以下是慢病毒在基因治疗中的主要作用： 1. 基因转导载体 慢病毒能够有效地将外源基因导入目标细胞，并整合到宿主细胞的基因组中。这种整合特性使其特别适合于需要长期表达的基因治疗，如慢性疾病或遗传性疾病的治疗。 2. 治疗遗传疾病 慢病毒载体可以携带正常功能的基因，替代因突变或缺失而失活的基因，从而纠正遗传疾病。例如，用于治疗β-地中海贫血、镰状细胞贫血等单基因遗传病。 3. 肿瘤治疗...

选择合适的腺相关病毒（AAV）血清型是成功开展实验的关键，具体取决于实验目标、靶细胞类型、组织分布和基因表达需求。 以下是选择AAV血清型时需要考虑的几个因素： 1. 靶细胞或靶组织类型 不同的AAV血清型具有特定的组织或细胞倾向性（即“嗜性”）。以下是一些常用血清型及其主要靶组织： AAV1：骨骼肌、心肌、中枢神经系统（CNS） AAV2：视网膜、肝脏、CNS（常用，但具有较高的免疫反应） AAV5：肺、神经元、视网膜 AAV6：肺、骨骼肌、心肌 AAV7和AAV8：肝脏、骨骼肌...