知识分享

腺相关病毒（AAV）和腺病毒（AdV）是两种不同的病毒载体，它们在基因治疗中有着各自的优势和特点。以下是它们之间的主要区别： 1.病毒结构和基因组： AAV是无包膜的单链DNA病毒，属于微小病毒科，基因组长约4.7kb，包括两个开放读码框架(ORF)以及2个反向末端重复序列(ITR)。 腺病毒是无包膜的双链DNA病毒，基因组长度约为36kb，两端各有一个103 bp的反向末端重复序列(ITR)。 2.复制能力： AAV是一种复制缺陷型病毒，需要辅助病毒（如腺病毒）参与复制。 腺病毒可以独立复制，不依赖于宿主细胞的分裂。...

AAV载体是指利用腺相关病毒（Adeno-associated Virus, AAV）构建的基因传递工具，用于将外源基因传送到目标细胞或组织中，以实现基因表达或基因修复。在基因治疗中，AAV载体的构建通常包括将AAV病毒的非必要基因去除，然后插入需要传递的治疗性基因。经过改造的AAV载体不会引起病毒性疾病，但保留了病毒将基因传递到宿主细胞的能力。 在基因治疗中，腺相关病毒（Adeno-associated virus, AAV）作为载体有一些显著的优势，使其在很多基因治疗应用中成为首选。AAV的优势主要包括以下几个方面：...

近期Signal Transduction and Targeted Therapy杂志（IF=40.5）上发表了一篇重量级AAV基因治疗综述文章（通讯作者为美国马萨诸塞大学Chan医学院的高光坪教授），深入探讨了AAV基因治疗的最新突破与未来趋势。这篇文章不仅汇聚了行业内的权威观点，更揭示了关键技术的最新动态，为学术界和产业界的创新提供了全新启发。前几章我们分别学习了AAV的基础知识、AAV的载体开发、AAV的生产工艺以及AAV的临床应用，相信大家都有不少收获，下面我们继续深入学习AAV临床应用中存在的免疫原性和应对策略。...

慢病毒包装（lentivirus packaging）是指利用慢病毒（Lentivirus）作为载体，将外源基因（如治疗性基因、报告基因或特定的RNA干扰序列）插入到慢病毒载体中，并通过细胞培养技术在体外产生具有感染能力的慢病毒颗粒的过程。这些病毒颗粒随后可以用于感染目标细胞，将外源基因传递到宿主细胞中，实现基因的稳定表达或基因沉默。 慢病毒包装质粒是用于构建和包装慢病毒载体的质粒组合。慢病毒载体系统通常需要三种主要类型的质粒来实现有效的病毒包装和转导能力： 1.载体质粒（Transfer...

1.短期保存：如果在短时间内（一周内）使用慢病毒，可以将病毒置于4℃保存。 2.长期保存：对于需要长期保存的慢病毒，建议将病毒分装后放置于-80℃。在-80℃条件下，慢病毒可以保存6个月以上。若超过6个月，建议在使用前重新测定病毒滴度。 3.避免反复冻融：反复冻融会降低病毒滴度，每次冻融可能会降低病毒滴度10%-50%。因此，应尽量避免反复冻融，并根据每次实验用量进行分装。 4.分装建议：为了减少反复冻融的影响，建议将病毒分装成小体积（如200 μL/tube）后保存于-80℃。...

慢病毒（Lentivirus）是逆转录病毒的一种，基因组为双链RNA。慢病毒载体（Lentiviral vectors, LVs）是基于人免疫缺陷病毒（HIV）改造而成的病毒载体系统，能够高效地将目的基因（或RNAi）导入动物和人的原代细胞或细胞系，对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力 慢病毒载体在基因治疗中的优势主要包括以下几点： 1.长期稳定的基因表达：慢病毒载体可以将外源基因整合到宿主细胞基因组上，实现目的基因长时间稳定的表达，不随着细胞分裂传代而丢失。...

慢病毒包装系统通常需要以下几种质粒和细胞来完成包装过程： 1. 质粒 慢病毒包装系统一般需要三个或四个质粒，通常包括以下几种： 载体质粒：含有目标基因和慢病毒的长末端重复序列（LTRs）。这个质粒包含目标基因的表达框架，通常是人们需要转染到目标细胞中的基因。 包装质粒：提供病毒结构蛋白和功能蛋白，例如 Gag、Pol 等。这些蛋白质是病毒复制和组装的必要组件。 外壳质粒（包膜质粒）：编码病毒包膜蛋白 VSV-G（病毒性出血热病毒糖蛋白），使慢病毒可以感染广泛的宿主细胞。这是常用的包膜蛋白，其他的包膜蛋白也可以用于特定的细胞靶向。...

中枢神经系统被称为我们身体的“控制中心”，它不仅功能关键，而且能量消耗极大，但由于本身较为脆弱，且无法储存能量物质，因此需要持续不断的血液供应。大约四分之一的血液流量都用于供养大脑。然而，血液中常含有可能危害大脑的有害物质。为了保护大脑免受这些潜在的损害，血脑屏障（blood-brain barrier, BBB）成为抵御有害物质入侵的第一道防线。...

AAV6血清型在转导效率方面与其他AAV血清型相比具有以下特点： 肌肉组织转导效率：AAV6在肌肉组织中的转导效率较高，与AAV1相似，因此在骨骼肌疾病和心脏疾病中表现出优势。 肺部转导效率：AAV6能够有效介导基因在气道和肺泡II型细胞的表达，这些细胞是肺部疾病基因治疗的靶细胞群体，因此AAV6被认为是用于肺部基因转移的理想AAV血清型之一。在小鼠及一些较低等灵长类动物中，AAV6是感染肺部的理想选择。 心脏转导效率：在心脏研究中，AAV6对心脏有较好的感染效率，但AAV9的感染效率较优于AAV6。...

选择合适的AAV血清型进行体内实验时，需要考虑多个因素，包括目标组织或器官的类型、血清型的组织特异性、感染效率以及扩散能力。以下是一些常见AAV血清型及其靶向性的总结，以帮助您做出选择：...