知识分享

基因敲低（knockdown）和基因敲除（knockout）都是研究基因功能的重要技术手段，但两者在机制、效果和应用上存在明显区别： 1. 定义与机制 基因敲低（knockdown）： 是暂时性或部分抑制某个基因的表达。 通常通过RNA干扰（RNAi）手段（如siRNA、shRNA）减少mRNA的表达量，从而降低蛋白质的合成。 细胞中该基因仍然存在，但表达水平大大降低。 基因敲除（knockout）： 是永久性完全删除或失活某个基因。...

rAAV（Recombinant Adeno-Associated Virus，重组腺相关病毒）是一种经过基因工程改造的病毒载体，常用于基因治疗和分子生物学研究。 rAAV是一种经过改造的病毒载体，它源自天然的腺相关病毒（AAV），但去除了病毒自身复制和致病的基因，仅保留包装所需的元件，并加入了目标治疗基因，从而成为一种安全、有效的基因传递工具。 1.主要特点： 非致病性：野生型AAV天然无致病性，不会引起人类疾病。 低免疫原性：相比其他病毒载体（如腺病毒），rAAV引发的免疫反应较弱。...

CMV启动子是组成型启动子（Constitutive promoter）的一种，但两者在定义和应用上存在一些差异。以下是它们的核心区别和特点： 1. 定义与分类 组成型启动子： 广泛定义：指在大多数细胞类型和生理条件下持续活跃、不需要诱导即可驱动基因持续表达的启动子。 特点：表达不受环境或发育阶段调控，适合需要基因“始终开启”的实验或应用。 常见类型：CMV、SV40、EF1α、PGK等。 CMV启动子： 具体来源：来源于巨细胞病毒（Cytomegalovirus）的强启动子。...

为进一步加速医药健康产业创新，推动细胞与基因治疗等创新药、创新医疗器械高质量发展，4月7日，北京市医疗保障局、北京市卫健委、北京市药品监督管理局等九部门联合发布《北京市支持创新医药高质量发展若干措施（2025年）》，其中指出：高质量建设国际医药创新园区，启动建设北京临床研究中心，聚焦医学人工智能、细胞和基因治疗、合成生物等前沿领域开展全球领先的临床研究和技术转化。加快建设干细胞创新转化中心、疫苗与蛋白药物智造研究院等重大平台，持续建设小分子、核酸药物等合同研发生产组织平台。持续提升中关村生命科学园产业发展能级，聚焦细胞与基因治疗、脑机...

派真生物（PackGene）是一家专注于重组腺相关病毒（rAAV）载体包装与基因治疗技术的领先企业，成立于2014年，总部位于广州市黄埔区。 一、公司背景与定位 派真生物以“让老百姓用得起基因治疗”为使命，专注于为全球客户提供从基础研究到临床试验的 AAV病毒载体生产 和 质粒工艺开发 服务。作为CRO（合同研究组织）和CTDMO（合同技术开发与生产组织），其客户涵盖20多个国家的顶级跨国药企及知名科研机构（如中科院、哈佛医学院），已交付上万批次AAV样品。 二、核心技术与平台 高产技术平台 依托 π-Alpha™...

过表达病毒载体是基因功能研究和基因治疗中常用的工具，用于将目标基因高效导入宿主细胞并实现过量表达。以下是常见的病毒载体类型及其特点： 1. 腺病毒（Adenovirus） 特点： 基因组：线性双链DNA，不整合到宿主基因组。 感染细胞类型：分裂和非分裂细胞均可感染。 表达时间：短暂表达（数天至数周），因免疫反应可能被清除。 容量：较大（可携带约8-10 kb外源基因）。 免疫原性：高，易引发宿主免疫反应。 应用： 体外或短期体内实验（如疫苗开发、肿瘤基因治疗）。 需要快速、高水平表达的实验。 2. 慢病毒（Lentivirus）...

TBG启动子是一种基于人甲状腺结合球蛋白（TBG）启动子和微球蛋白增强子的混合型启动子，主要用于肝脏特异性转外源基因表达。 肝脏特异性表达 TBG启动子能够驱动基因在肝细胞中特异性表达，仅在成熟的肝实质细胞中有转录活性。与白蛋白启动子（Alb）相比，TBG启动子在肝细胞中的特异性更高，不会在肝前体细胞或胆管上皮细胞中出现非特异性表达。 高效的基因表达 TBG启动子在肝细胞中的转录活性较高，能够高效地驱动外源基因的表达。其表达效率与常用的广谱启动子CMV、CAG相当。 降低对其他组织的影响...

慢病毒荧光蛋白质载体（Lentiviral Fluorescent Protein Vector）是一种结合慢病毒载体系统和荧光蛋白报告基因的工具，广泛应用于基因表达调控、细胞示踪、感染效率检测以及细胞分选等领域。 1. 慢病毒载体的基本结构 慢病毒载体基于HIV-1病毒改造而成，具有感染分裂和非分裂细胞的能力。其核心组成包括： 转移质粒（Transfer Plasmid）：携带目标基因（如荧光蛋白基因）和包装所需的顺式作用元件（如LTR、Ψ包装信号）。 包装质粒：提供病毒结构蛋白（Gag、Pol）和调节蛋白（Rev）。...

AAV（腺相关病毒）载体常用的启动子根据其功能（组成型、组织特异性或可诱导型）和应用场景有所不同。以下是常见分类及具体启动子的详细介绍： 一、组成型启动子（广泛表达） 1.CMV（Cytomegalovirus Immediate Early Promoter） 特点：强启动子，在多数哺乳动物细胞中高表达，但可能引发免疫反应或表达随时间衰减。 应用：适用于需要短期高表达的实验（如体外研究或疫苗开发）。 2.EF1α（Elongation Factor 1α Promoter）...

在基因治疗领域，腺相关病毒（AAV）因其安全性和高效的基因递送能力而成为主流载体。然而，天然AAV血清型在组织特异性、穿透能力及免疫原性方面存在一定局限，开发具有更优特性的新型AAV血清型已成为提升基因治疗效果的关键策略。 “AAV衣壳突变体库”的构建为新型血清型筛选和定向进化提供了强大技术支撑。本文将系统介绍AAV衣壳突变体库的主流构建方法及技术要点，助力您理解和设计更高效的血清型筛选实验。 一、AAV衣壳突变体库构建的核心原理...