该项研究成果由正序生物联合创始人陈佳教授、杨力研究员、殷昊教授以及杨贝教授的科研团队合作完成，论文第一作者王丽洁博士已于近期全职加入正序生物。四位科学家在各自的研究领域为该研究成果的开发、改进、创新和应用提供了全方位的指导和建议，该研究成果的成功开发得益于正序生物科研团队独特的研发模式：“整合各自团队特有的专利和技术优势，使其更好地契合公司的研发管线，同时公司的研究紧密结合各实验室的研究进展和成果，不断扩大技术优势，从而建立特有的治疗体系。”
该项研究首先发现了多种胞嘧啶脱氨酶抑制剂（deoxycytidine deaminase inhibitor, dCDI）可以抑制胞嘧啶脱氨酶的活性从而大大降低碱基编辑器的编辑效率，而tBE在原有的碱基编辑系统上融合表达一个dCDI蛋白和一个拆分的TEV酶，并将拆分的TEV酶的C半端(TEVc)连接到hsgRNA和sgRNA形成的双定位系统上，TEV酶的N半端(TEVn)游离表达，这样可以使TEV酶精确地在目标编辑区域靶向切割dCDI，从而让tBE仅仅在靶标位置处恢复编辑活性而在脱靶位置处丧失编辑活性，进而使得碱基编辑器在目的序列处产生高效编辑而在全基因组和全转录组范围内不产生脱靶编辑。更为重要的是，tBE系统可以经双AAV载体高效地递送到小鼠体内，通过引入终止密码子抑制PCSK9（proprotein convertase subtilisin/kexin type 9）蛋白表达，进而显著减少了小鼠血清中PCSK9的含量，降低总胆固醇30%～40%（图一）。
图一：tBE双AAV体内递送系统的构建和编辑效率
(a) tBE双AAV系统的构建示意图和主要的体内实验流程图。(b) 小鼠注射表达tBE的双AAV病毒载体的不同滴度梯度以及不同表达时间梯度时在体内介导的编辑效率。(c) 小鼠注射表达tBE的双AAV病毒载体的不同滴度梯度和不同表达时间梯度时，血清中PCSK9蛋白表达水平和胆固醇及甘油三脂水平。
这一研究成果基因编辑治疗领域具有重大意义。
首先，碱基编辑器能否从科研转化为临床前疾病疗法的关键点是编辑器脱靶效应和效率，此研究成果在小鼠体内成功实现靶位点的高效编辑并且没有检测到全基因组和全转录组的脱靶效应，无疑给业界人士和患者带来一支强心剂。
其次，如何对基因编辑工具开展安全有效的体内递送是碱基编辑走向临床的另一个难点，tBE系统的设计构型可以巧妙利用双AAV载体安全地递送到动物体内，并实现了精准、高效的靶向编辑。PCSK9的表达与低密度脂蛋白(low-density lipoprotein, LDL)水平有关，而LDL水平过高可能诱发血脂异常，甚至可能产生脑血管疾病、冠心病和外周动脉疾病，以及其并发症包括心肌梗死、缺血性心肌病、心脏性猝死等系列疾病，严重影响心血管健康。目前这类患者只能通过改变生活方式和同时加用他汀类药物的方法进行治疗，并选择性使用胆固醇吸收抑制剂依折麦布或PCSK9的抑制剂，需要长期服药才能维持疗效。
该研究成果通过靶向编辑Pcsk9.提前引入终止密码子降低PCSK9的表达，成功降低小鼠体内的LDL的水平，无疑为这类患者及相关病人带来了新的治疗希望，理论上可以达到一次治疗，终身治愈的效果。然而，从理论科学研究到小鼠体内，再到真正的造福于病患，还有很多问题需要研究和解决。
关于正序生物
正序生物是一家专注于运用新型碱基编辑系统等尖端基因编辑技术，致力于生物科技创新和突破性疗法，造福人类健康的高科技创新企业。正序生物紧紧依托科研团队的研究进展，同时汇集了国内外顶尖大学、研究机构的科学研究型人才以及在国内外知名药企拥有多年从业经验的转化团队，致力创建国内顶尖、世界一流的基因编辑治疗平台，为解除遗传性疾病或罕见病患者的病痛以及人类健康事业而奋斗。
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本研究成果中采用的AAV病毒包装由派真生物（PackGene）提供，包装的AAV病毒滴度与实际使用效果得到了正序生物科学家团队高度认可。
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最后，派真生物再次祝贺正序生物联合创始人以及杨贝教授的科研团队等科学家的成果发表和对派真生物一如既往的信任和支持，我们期待您在基因治疗领域取得更多重磅研究成果!