CRISPR基因编辑技术控制CAR -T细胞治疗的不良事件
12月 6, 2024
1.缓解CRS和ICANS
CAR-T细胞治疗常见的不良事件包括细胞因子释放综合征（CRS，由效应细胞过度激活和细胞因子大量释放引起的全身炎症反应）和免疫效应细胞相关神经毒性综合征（ICANS，以广泛神经症状为特征的中毒性脑病）。当前管理策略如大剂量皮质类固醇和托珠单抗虽有一定效果，但存在干扰CAR-T细胞功能或疗效有限的问题。
通过CRISPR-Cas9敲除GM-CSF可降低治疗毒性，减少炎症因子和趋化因子水平，同时保持强大的抗肿瘤活性。这可能与GM-CSF缺失的CAR-T细胞抑制内在凋亡途径有关。
此外，核细胞通过CD40L-CD40R轴或通过摄取GM-CSF刺激促炎细胞因子的分泌。而CRISPR介导的敲除CAR – T细胞中的CD40L和/或CSF2可显著降低旁观者单核细胞分泌IL-6。
在湖南思为康医药的一项临床实验中，3名血液恶性肿瘤患者采用了GM-CSF敲除及IL-6和IL-1阻滞剂自主共表达的CAR-T细胞疗法。结果显示，其中两名患者未出现细胞因子释放综合征（CRS），仅有一名患者出现了II级的CRS症状。
CAR-T细胞的靶抗原常同时存在于正常和恶性细胞上，从而导致脱靶毒性问题。可使用CRISPR系统进行基因编辑解决此问题。
CD7和CD5在致病性和正常T细胞上均表达，导致CAR-T细胞自相残杀。利用CRISPR系统敲除CAR-T细胞上的CD5或CD7可增强其抗肿瘤能力。此外，CAR-T被恶性T细胞污染是一大临床应用障碍，而CRISPR系统可同时敲除CD7和TRAC，制备通用CD7 CAR-T细胞，已显示良好治疗效果。
另外，CD33和CD45在正常髓系细胞和血细胞上均有表达，故靶向这两个点的CAR-T细胞疗法需通过CRISPR系统敲除或表位碱基编辑进行修饰，以保护正常细胞功能并增强抗肿瘤活性。
亘喜生物（现已被阿斯利康公司收购）WU-CART-007产品正是基于这一原理研发。WU-CART-007使用CRISPR/Cas9同时敲除了健康供体T细胞上的CD7和TRAC基因，制造出了规避了CAR-T细胞自相残杀的通用型CAR-T细胞疗法，有效增加了其有效性和安全性。
一项WU-CART-007针对复发/难治性（R/R）T细胞急性淋巴细胞白血病/淋巴瘤（T-ALL/LBL）患者中的Ⅱ期临床研究结果显示：
有73%患者达成复合完全缓解率（CRc）的主要终点，总缓解率（ORR）达91%。
药代动力学分析显示该同种异体细胞疗法的快速扩展和持久性：WU-CART-007于RP2D剂量时的扩展在第10天达到峰值，并在第90天仍可检测到。
另外，无患者产生针对该疗法的特异性抗HLA抗体。至结果公布时未检测到任何患者产生抗药抗体。
